實(shí)驗(yàn)方法原理
水合氯醛腹腔麻醉，采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島，并分離、培養(yǎng)胰島單細(xì)胞。
1. 用無菌D-Hanks’液將組織塊清洗 2~3 次，加入新鮮酶液繼續(xù)消化，重復(fù)上述步驟，此時(shí)組織塊邊緣模糊。
2. 將組織塊浸入消化酶液中，38℃±1℃消化10 分鐘，將消化酶液與組織塊分開，組織塊重新加入新鮮消化酶液進(jìn)行消化；而原消化酶液1500 rpm離心 10 分鐘，取沉淀即為消化下的細(xì)胞，重新用無菌D-Hanks’懸浮，離心，重復(fù) 1~2 次，再用培養(yǎng)基洗 2~3 次，用培養(yǎng)基懸浮即得細(xì)胞懸液。
3. 將消化過的組織塊重復(fù)消化5~6 次至組織塊消化*，重復(fù)以上操作。
4. 合并幾次所得細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，大鼠調(diào)整細(xì)胞濃度為 2×105個(gè)細(xì)胞/mL，將細(xì)胞懸液接種于24 孔塑料培養(yǎng)板中，每孔1 mL，置于37℃，5%CO2，飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5. 由于成纖維細(xì)胞貼壁要比胰島細(xì)胞迅速，接種15 h 后，輕輕振蕩培養(yǎng)板，將上面未貼壁的細(xì)胞接入新的培養(yǎng)板中，可除去部分成纖維細(xì)胞。
0.2g 薯莨 TLC法鑒別 121295-0301
3.0g 蒺藜 TLC法鑒別 121296-200703
2.0g 石吊蘭 TLC法鑒別 121297-
1.0g 隔山消 TLC法鑒別 121298-200402
0.5g 大果木姜子 TLC法鑒別 121300-0301
5.0g 羊奶奶葉 TLC法鑒別 121301-
1.0g 見血飛 TLC法鑒別 121302-200301
1.0g 甘草（脹果甘草） TLC法鑒別 121303-200502
大鼠1g 莪術(shù)（溫郁金） TLC法鑒別 121304-
2.0g 結(jié)石草 TLC法鑒別 121305-200301
0.5g 紫色姜 TLC法鑒別 121306-200301
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