收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態最佳
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產品名稱 | 大鼠毛囊干細胞 | 貨號 | EY-XY3569 |
英文名稱 | 詳見說明 | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測：角蛋白19免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基：大鼠毛囊干細胞專用培養基
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產品貨期現貨，1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
毛囊作為一種重要的皮膚附屬器官，最為顯著的特點是始終處于生長期、退行期和休止期的周期性循環中。毛囊內外由上皮性毛根鞘和毛囊周圍鞘兩部分組成，兩者之間有玻璃膜。上皮性毛根鞘起源于表皮,又分內根鞘和外根鞘。外根鞘相當于表皮的基底層和棘細胞層。在峽部末端外毛根鞘細胞增殖, 并且形成隆起, 成為毛發上段的標記。該隆突部位可環繞整個峽部末端或僅限于單側即立毛肌附著處, 目前被認為是毛囊干細胞存在的主要部位。研究表明，毛囊干細胞能分化成毛囊、皮脂腺、表皮，是皮膚組織工程理想的種子細胞。 |
1.準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。
7.計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。
8.培養：置于36.5℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶蓋需擰松半圈。
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